因業(yè)務(wù)調(diào)整,部分個人測試暫不接受委托,望見諒。
谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶檢測:原理、應(yīng)用與標(biāo)準(zhǔn)化實踐
簡介
谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶(Alanine Aminotransferase, ALT),又稱丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶,是人體內(nèi)一種重要的代謝酶,廣泛分布于肝臟、腎臟、心肌等組織中,其中以肝細(xì)胞內(nèi)的活性最高。ALT的主要功能是催化丙氨酸與α-酮戊二酸之間的氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng),生成丙酮酸和谷氨酸,參與氨基酸代謝與能量循環(huán)。當(dāng)肝細(xì)胞因炎癥、壞死或損傷時,ALT會釋放至血液中,導(dǎo)致血清ALT活性顯著升高。因此,ALT檢測被公認(rèn)為評估肝細(xì)胞損傷的敏感指標(biāo),在臨床診斷、疾病監(jiān)測及健康管理中具有重要價值。
檢測項目及簡介
ALT檢測的核心目標(biāo)是測定血清或血漿中ALT的酶活性水平,通常以單位每升(U/L)表示。檢測項目主要包括以下兩類:
- 血清ALT活性測定:通過定量分析血清中ALT的催化活性,間接反映肝細(xì)胞受損程度。
- 聯(lián)合檢測:常與天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)等其他肝酶指標(biāo)聯(lián)合檢測,結(jié)合AST/ALT比值(De Ritis比值)輔助鑒別肝病類型(如病毒性肝炎與酒精性肝?。?/li>
檢測結(jié)果可為急慢性肝炎、藥物性肝損傷、肝硬化等疾病的診斷提供依據(jù),并用于監(jiān)測治療效果或評估預(yù)后。
適用范圍
ALT檢測的臨床應(yīng)用場景廣泛,主要包括:
- 肝炎診斷與鑒別:病毒性肝炎(如甲肝、乙肝、丙肝)急性期常伴隨ALT顯著升高;酒精性肝炎或非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD)患者也可出現(xiàn)ALT水平異常。
- 藥物肝毒性監(jiān)測:長期服用抗結(jié)核藥物、化療藥物或他汀類降脂藥的患者需定期檢測ALT,以早期發(fā)現(xiàn)藥物性肝損傷。
- 健康體檢篩查:作為肝功能常規(guī)檢查項目,用于無癥狀人群的肝病早期篩查。
- 慢性肝病管理:對肝硬化、肝癌等慢性肝病患者進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測,評估病情進(jìn)展。
- 其他疾病關(guān)聯(lián)性分析:如心肌梗死、肌肉疾病等非肝臟疾病也可能引起ALT輕度升高,需結(jié)合臨床癥狀綜合判斷。
檢測參考標(biāo)準(zhǔn)
為確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性與可比性,ALT檢測需遵循國際或國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)化組織發(fā)布的技術(shù)規(guī)范,主要包括:
- 國際臨床化學(xué)聯(lián)合會(IFCC)標(biāo)準(zhǔn):
- 標(biāo)準(zhǔn)號:IFCC Primary Reference Procedures
- 標(biāo)準(zhǔn)名稱:《Measurement of Catalytic Activity of Alanine Aminotransferase at 37°C》 該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了ALT檢測的最適反應(yīng)條件(如溫度、底物濃度)及方法學(xué)驗證要求。
- 中國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn):
- 標(biāo)準(zhǔn)號:WS/T 404.7-2022
- 標(biāo)準(zhǔn)名稱:《臨床常用生化檢驗項目參考區(qū)間第7部分:血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶》 該標(biāo)準(zhǔn)明確了健康人群ALT的參考區(qū)間(男性:9-50 U/L;女性:7-40 U/L)及檢測方法的技術(shù)要求。
- 美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(CLSI)指南:
- 標(biāo)準(zhǔn)號:CLSI EP05-A3
- 標(biāo)準(zhǔn)名稱:《Evaluation of Precision of Quantitative Measurement Procedures》 該指南為實驗室建立ALT檢測的精密度與準(zhǔn)確度提供了方法學(xué)框架。
檢測方法及相關(guān)儀器
ALT檢測方法主要基于酶促反應(yīng)動力學(xué)原理,目前臨床實驗室普遍采用速率法(連續(xù)監(jiān)測法)或終點法(固定時間法):
-
速率法
- 原理:在37℃恒溫條件下,ALT催化L-丙氨酸與α-酮戊二酸反應(yīng)生成丙酮酸,后者與NADH在乳酸脫氫酶(LDH)作用下轉(zhuǎn)化為L-乳酸,同時NADH被氧化為NAD+。通過分光光度計在340 nm波長下監(jiān)測NADH吸光度的下降速率,計算ALT活性。
- 優(yōu)勢:操作簡便、靈敏度高,適合自動化分析。
-
終點法
- 原理:在反應(yīng)終止后,通過顯色劑(如2,4-二硝基苯肼)與反應(yīng)產(chǎn)物酮酸結(jié)合生成紅棕色化合物,測定其吸光度以推算ALT活性。
- 應(yīng)用場景:適用于不具備連續(xù)監(jiān)測功能的小型實驗室,但精密度略低于速率法。
主要檢測儀器:
- 全自動生化分析儀:如羅氏Cobas系列、貝克曼庫爾特AU系列、西門子ADVIA系列等,可高通量完成ALT檢測,并實現(xiàn)與其他肝功能的聯(lián)合分析。
- 分光光度計:用于手動或半自動檢測,需配合恒溫水浴箱及比色杯完成反應(yīng)體系監(jiān)測。
結(jié)語
ALT檢測作為肝功能評估的基石,其科學(xué)性與規(guī)范性直接影響臨床決策的準(zhǔn)確性。隨著檢驗技術(shù)的進(jìn)步,自動化檢測平臺與標(biāo)準(zhǔn)化試劑的普及顯著提升了檢測效率與結(jié)果一致性。未來,結(jié)合人工智能算法對ALT動態(tài)變化模式的分析,或?qū)楦尾≡缙陬A(yù)警提供更精準(zhǔn)的支持。臨床實踐中,需嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)操作流程,結(jié)合患者病史與其他指標(biāo)綜合解讀檢測結(jié)果,以實現(xiàn)個體化診療目標(biāo)。
復(fù)制
導(dǎo)出
重新生成
分享